载体建设是什么意思
载体构建(vectorconstruction)，为把DNA分子运送到受体细胞中去，必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。
理想的运载体是质粒(plasmid)，在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。载体构建即是构建含外源DNA的质粒。
延伸阅读
gateway载体构建原理
Gateway 的原理也是建立在噬菌体 DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体和细菌的整合因子(INF、Int)的作用下，lambda 的 attP 位点和大肠杆菌基因组的 attB 位点可以发生定点重组，lambda 噬菌体 DNA 整合到大肠杆菌的基因组 DNA 中,两侧产生两个新位点: atL 和 attR。这是一个可逆的过程，如果在一个噬菌体编码蛋白 Xis 和 IHF、Int 的共同介导下这两个新位点可以再次重组回复为 attB和 attP 位点，噬菌体从细菌基因组上裂解下来。这一过程的方向是受控于两个重要因素:存在的介导蛋白和重组位点。
基因表达载体构建的意义
基因表达载体构建是指目的基因与运载体结合。
基因表达载体构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
基因表达载体构建的意义是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
基因表达载体的构建的原则
1、必须能够在宿主细胞中复制，使重组基因能够在宿主基因中复制，从而稳定保存下来，这是作为运载体的必须条件。
2、具有多个限制酶切点，从而可以使不同的粘性末端与之相连，增强实用性。
3、拥有标记基因，方便质粒进入宿主细胞后容易被检测出来，以便检测目的基因是否导入受体。
互补在载体构建的作用
α-互补在载体构建中的作用：
在载体上加lacZ’/(MSC),并在受体菌中引入lacZ △M15即可实现α-互补.IPTG是lac操纵子的诱导物,底物X-gal被β-半乳糖苷酶分解后可以产生蓝色.如果质粒载体中插入了外源DNA, lacZ’的产物则不能与lacZ△M15基因的产物实现α-互补，在 IPTG 诱导下不能产生有活性的β-半乳糖苷酶，菌落便不可能呈现蓝色。
白色菌落便是含有插入了外源DNA的重组质粒。因此可利用菌落颜色变化来筛选插入外源DNA的重组质粒。这种方法是根据组织化学的原理来筛选重组体。主要是在λ载体的非必要区插入一个带有大肠杆菌β-半乳糖苷酶的基因片段，携带有lac基因片段的λ载体转入。
请教一下,基因表达载体构建的原理和操作步骤
先回答你的问题，转入外源基因的农杆菌不能较载体，它本身是外源基因的受体，携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体。
你想问基因表达载体的构建，这个问题太大，而且表达载体多种多样，用处也很多，所以很难一下子概况。我只能大概说一下：
原理：将外源基因片段与载体连接（载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒），将重组的载体转染受体细胞，使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内，是宿主细胞能够表达载体上的外源基因，从而获得新性状或者新产物。
大概步骤：
1）从基因组或cDNA上克隆得到完整的目的基因（至少包含CDS区），通常在两端加粘性末端或重组位点
2）选择合适的表达载体（真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等）
3）将克隆得到的目的基因与载体连接
4）将重组载体通过某种手段转入受体，即宿主中（化学转染、脂质体、电转、显微操作等）
5）筛选阳性的宿主细胞并扩繁
为什么构建载体
基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。 将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体， 首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同 一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合，形成重组DNA分子（也叫重组质粒）的。农杆菌可以做质粒载体的宿主细胞，但有些条件，比如必须是双子叶植物，或者是裸子植物~具体看链接吧，还有不懂的，追问吧
制备转基因的五个环节
以植物转基因为例：
1、载体构建：包括目的基因扩增，表达载体构建。
2、遗传转化：最简单的花序浸染，常用的农杆菌转化、基因枪轰击，还有花粉管通道等。
3、阳性筛选：标记基因筛选，阳性植株目的基因DNA水平PCR检测、RNA水平PCR检测、目的基因表达蛋白水平检测。
4、功能验证：即表型分析（验证转基因是否在体内表达）。
构建载体的载体是什么
载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。主要包括已有载体多克隆位点MCS的改造和已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造。载体构建完成后可利用PCR原理进行测序验证。
载体构建的原理及方法
原理: 载体构建是把连接好的DNA 分子运送到受体细胞中去。首先,必须寻找一种能进 入细胞,在装载了外来DNA 片段后仍能照样复制的运载体。
理想的运载体是质粒,在 基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。当给质粒插入一段外源DNA 片段后,它 依然能够继续进行自我复制。
