荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别？
一、原理不同
1、荧光显微镜：是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。
2、激光共聚焦显微镜：在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针。
二、特点不同
1、荧光显微镜：用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光。
2、激光共聚焦显微镜：利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。
荧光显微镜观察活细胞还是死细胞？
活死细胞
dapi染色观察到蓝色荧光是活细胞
因为DAPI可以透过完整的细胞膜，DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) 。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。
荧光显微镜历史？
激光扫描共聚焦荧光显微镜
激光扫描共聚焦显微镜，采用激光为光源，在传统荧光显微镜成像的基础上，附加了激光扫描装置和共轭聚焦装置，通过计算机控制来进行数字化图像采集和处理的系统。主要包括扫描模块、激光光源、荧光显微镜、数字信号处理器、计算机以及图像输出设备等。
历史
·1957年，Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理，获得了美国的专利。
·1967年，Egger和Petran成功地应用共聚焦显微镜产生了一个光学横断面。
·1977年，Sheppard和Wilson首次描述了光与被照明物体的原子之间的非线性关系和激光扫描器的拉曼光谱学。
·1984年，Biorad为公司推出了世界第一台商品化的共聚焦显微镜，型号为SOM-100，扫描方式为台阶式扫描。
·1986年MRC-500型改进为光束扫描，用作生物荧光显微镜的共聚焦系统。
·1987年White和Amos在英国《自然》杂志发表了“共聚焦显微镜时代的到来”一文，标志着LSCM已成为进行科学研究的重要工具。
·随后Zeiss、Leica、Meridian、Olympus等多家公司相继开发出不同型号的共聚焦显微镜，产品的性能不断改进和更新，应用的范围也越来越广。
荧光显微镜为什么发出蓝光呢？
因为荧光显微镜多采用200W的超高压汞灯作光源，它是用石英玻璃制作，中间呈球形，内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起水银蒸发，球内气压迅速升高，当水银完全蒸发时，可达50～70个标准大气压力，这一过程一般约需5～15min。
超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。
它发射很强的紫外和蓝紫光，足以激发各类荧光物质，因此，为荧光显微镜普遍采用。
荧光显微镜的两种滤光片各起什么作用？
荧光显微镜(LWD300-38LFT，LW300LFT)的滤光片不止两种。种类有以下几种及其作用:
1. 吸热滤光片吸热滤光片是防止光源光谱中的热辐射线损伤光具组所必需的滤光片。
2.激发光滤光片激发光滤光片可以选择性吸收长波谱线而吸通透紫外线，紫色，蓝色和绿色光线的滤光片为激发滤色片。
3.阻挡滤光片阻挡滤光片是选择性吸收短波谱线和红外线而通透较长波长可视线的滤光片，其功能是使观察都能看到被检物体所激发出来的荧光，同时保护观察都的角膜免遭紫外线伤害4.色光分离滤光片色光分离滤光片是将激发光反射到被检物体上，使被检物体激发出荧光，再将荧光透射到目镜的滤光反射镜。这类滤我片只能用于落射光聚光器中，而透射光荧光显微镜不需要色光分离。5.干涉滤光片干涉滤光片是高性能激发滤光片的一种。它是将数张薄层金属膜叠放在抛光的两张玻璃片之间制成的滤光片。每张薄金属膜的折光系数都不相同，因此照明光源的各种不同波长的谱线在每张金属膜上反复进行反射，使得某些波长的谱线因相消干涉而抵消，另一些波长的谱线相加干涉而得以加强，并透射过去，这样得到透射波谱很窄、半波峰宽度只有6-20nm，透光度可达到60%-70%的滤光片。
荧光倒置显微镜用途？
1.倒置荧光显微镜 由荧光附件与倒置显微镜有机结合构成的,主要用于细胞等活体组织的荧光、相差观察。
2.倒置显微镜多用于无色透明的活体观察,在倒置显微镜的基础上添加一套荧光附件:激光激发块,荧光光源,荧光照明器,激发块切换装置,即可进行倒置荧光观察。
荧光显微镜是用来看荧光标本的，它的波长短，普通显微镜是用普通可见光源看标本的。 原理:荧光镜检术是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体，使之受激发后而产生长波长的荧光，然后观察。
优点：检出能力高（放大作用）? 对细胞的刺激小（可以活体染色）? 能进行多重染色用途：? 物体构造的观察——荧光素? 荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体荧光等? 发荧光量的测定对物质定性、定量分析 。
倒置显微镜倒置显微镜inverted microscope组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于观察培养的活细胞，具有相差物镜。
倒置电脑型显微镜倒置显微镜和放大镜起着同样的作用，就是把近处的微小物体成一放大的像，以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。 物体位于物镜前方，离开物镜的距离大于物镜的焦距，但小于两倍物镜焦距。所以，它经物镜以后，必然形成一个倒立的放大的实像A’B’。 A’B’靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像A”B”后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身，而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。
荧光显微镜如何标定？
①开启汞灯后，在荧光显微镜工作台上放一张白纸，并从物镜转换器中转出物镜，即转换器上出现的空孔位于光轴上，卸去转换器上保护盖(如无空孔，可卸掉一个低倍物镜，校准完毕后再旋上)。转动荧光显微镜主体内的滤光片座，选一个透过绿光的滤光片组，使反射照明有光通过物镜转换器孔，此时在白纸上可以看到汞灯照亮的光斑。如光斑太亮，可以插入中性滤光片，或带上太阳眼镜，以保护眼睛。
②转动聚光镜调焦旋手，使汞灯光弧在白纸上成像清晰。因汞灯室内装有一个球面反光镜，用来增加亮度，于是在白纸上看到两个光弧的像。旋转汞灯调节旋手和反光镜位置调节旋手，使两个光弧并立。再转动反光镜聚焦调节旋手，使两个光弧有接近相等的亮度。
③旋转汞灯调节旋手和反光镜位置调节旋手，使两个光弧重合。再调节聚光镜调焦旋手，得到放大和均匀的光弧像。这样汞灯校准工作就完成了。转入物镜后，根据物镜具体倍率，稍微调节一下聚光镜调焦旋手就可以了。
荧光显微镜和普通显微镜有哪些不同之处？
主要区别
1荧光显微镜.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上；
2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；
3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人眼。
LW300LFT荧光显微镜也是光学显微镜的一种，主要的区别是二者的激发波长不同。由此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。
荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
